诺氟沙星含量测定

点击次数：5588 发布时间：2012-03-30

一、实验方法

Cometro液相色谱系统；

紫外检测器波长：278nm；

Kromasil C₁₈ 250*4.6mm 5u 色谱柱；

柱温：25℃；

流动相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺调pH=3.0）：乙腈=87:13；

流速：1.00ml/min；

诺氟沙星对照品-0.15mg/ml，样品；

进样量：对照品分别进样5ul，7.5ul，10ul，12.5ul，15ul各3次，样品进样10ul，使样品与标准品1:1混合再进样10ul，考察线性相关性，保留时间重现性，回收率。

二、谱图结果

附进样量，保留时间，峰面积关系表：

三、结果运算

1、保留时间重现性考察：

2、线性相关性考察及样品含量计算：

以标准品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，得线性方程：

由此可算出样品中诺氟沙星含量0.1205mg/ml。

3、回收率考察：

根据上面线性方程可算出混合后样品含诺氟沙星0.1342mg/ml，而实际真值是0.1352mg/ml，因此得回收率为99.20%。

四、综述

1、此三项考察综合考察了Cometro 6000 PVW UV/VIS检测器的吸收稳定性，Cometro 6000 LDI泵的流量性，进样伐、进样针的性，Kromasil色谱柱的性。

2、本实验流动相中三乙胺看似作用是调节pH，其实际zui大作用是调整峰型，因为诺氟沙星有含氮性基团，在酸性环境中容易与色谱柱中的硅羟基产生静电作用而拖尾，如下图：

而三乙胺可以代替物质与硅羟基作用，了物质的峰型。因此调节pH时候得注意三乙胺的加入量，不能过少，可以直接加入适量三乙胺，再用磷酸调节pH。