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C18色谱柱选用的基本原则及在日常使用过程中应注意的事项

点击次数:921 发布时间:2022-12-16
  C18色谱柱选用的基本原则及在日常使用过程中应注意的事项
  C18色谱柱选用的基本原则:
  (1)选用经过烷基化处理封口的填料可防止碱性化合物的拖尾现象。
  (2)选用含碳量的柱子,增加保留值。
  (3)选用较短的柱子。
  (4)选用小颗粒度的填料。
  (5)对分子量大的组分选用大孔径填料的柱子。
  C18色谱柱在日常使用过程中应注意的事项:
  (1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较的机械振动,以免柱床产生空隙。
  (2)如果仪器用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置1根柱,这样有助于延长柱子的寿命。
  (3)如使用柱温控制装置时,应注意在通入流动相后才能升温。
  (4)流动相使用前需进行脱气处理,以免降低柱效和影响检测等。样品溶液需经适当的前处理及过滤,以减少柱污染和堵塞。
  (5)在更换流动相种类时,应注意溶剂的互溶性,防止发生盐析现象。
  (6)柱子的实际操作压力应低于填装时的较压力,在压力一半以下。
  (7)属非性键合相色谱柱,流动相的pH值应严格控制在一定区间之间,以免损坏柱子。
  (8)在完成分离分析工作之后,不应立即停机,需及时对色谱分析系统进行冲洗,以除去色谱柱内的杂质。
  (9)如果流动相中有盐类,首用水充分清洗。如果是胺类添加到流动相中,要用甲醇和磷酸溶液混合溶剂冲洗,不要只用水冲洗。
  (10)C18一般用甲醇作为保存溶剂,以防柱子干裂而损坏。严禁水或缓冲溶液长时间在色谱流路中保留。
  (11)选用合适的C18保护柱,以保护分析柱免受杂质颗粒及不可逆吸附的干扰物的影响。保护柱内装填料颗粒度应与分析柱填料的颗粒度尽量一致。

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