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进口色谱柱的常见故障及排除方法
点击次数：1911 发布时间：2017-05-24
进口色谱柱的常见故障及排除方法
液相色谱仪的色谱柱在使用一段时间后，会出现一定的常见故障，如果不能好的判断并解决就会影响色谱柱的使用效果，从而影响样品的分析结果。
进口色谱柱常见的几种故障判断及排除方法：
1柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是 指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI（3.3 Bar）之间（在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的）。压力过、过低都属于柱压问题。
1.1 压力过 这是液相在使用中zui常见的问题，指的是压力突然升，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。
（1）.首断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用纯水冲洗干净。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，在检查；
（2）.打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇声半个小时。如果压力降至100PSI （6.7 Bar）以下，过滤白头正常，在检查；
（3）.把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。如果是一些保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，容易造成柱效下降，所以尽量少用。
1.2压力过低压力过低的现象一般是由于系统泄漏，处理方法：寻找各个接口处，是色谱柱两端的接口，把泄漏的地方旋紧即可。当然还有一个原因就是泵里进了空气，但此时表现的往往是压力不稳，忽忽低，更严重一点会导致泵无法吸上液体。处理方法：打开Purge阀，用3~5ml/min的流速冲洗，如果不行，则要用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。
2漂移问题 主要包括基线漂移和保留时间漂移。
2.1基线漂移 一般说来，机器刚起动时，基线容易漂移，大概要半个小时的平衡时间，如果你用了缓冲溶液或缓冲盐，还有就是在低波长下（220nm）平衡时间相对会比较长，但如果你在实验过程中发现基线漂移，则你要考虑下面的原因：
1.紫外灯能量不足。解决方法：更换的紫外灯
2.柱温波动。解决方法：控制好柱子和流动相的温度，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。
3.流通池被污染或有气体。 解决方法：用甲醇或其他性溶剂冲洗流通池（断开柱子）。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用盐酸）。
4.流动相污染、变质或由低品质溶剂配成。解决方法：检查流动相的组成，使用品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。
5、样品中有保留的物质（K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升的基线。解决方法：使用保护柱，如有必要，在进样之间。在分析过程中，定期用溶剂冲洗柱子。
6、检测器没有设定在zui大吸收波长处。解决方法：将波长调整至zui大吸收波长处
7、流动相的PH值没有调节好。解决方法：加适量的酸或碱调至*PH值
2.2保留时间漂移 保留时间重现是液相性能好坏的一个重要标志，同一种东西，两次的保留时间相差不要过15s，过了半分钟可看做保留时间漂移，就无法进行定性，你要考虑以下原因：
1、温控不当。解决方法：调好柱温，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。
2、流动相比例变化。解决方法：检查四元泵的比例阀是否有故障
3、色谱柱没有平衡。解决方法：在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱
4、流速变化。解决方法：重设定流速
5、泵中有气泡。解决方法：、从泵中除去气泡
2.3 峰型异常问题 峰型问题是液相的主要问题，在做液相过程中，我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型，对于各种各样的异常峰，要区别对待，从主要问题出发，一个一个加以解决。
1、峰均为宽峰。解决方法：系统未达到平衡；溶解样品的溶剂性比流动相差多；色谱柱尺寸及类型选择不正确；色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；温度变化造成的影响。 、
2、所出峰比预想的小。解决方法：样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确．定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。
3、色谱图中未出峰。解决方法：系统未进样或样品分解；泵未或流动相使用不正确；检测器设置不正确；针对以上情况成因作相应调整即可。
4、 一个峰或几个峰是负峰。解决方法：流动相吸收本底；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。
5、 峰均为负峰。解决方法：信号电缆接反或检测器输出性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。
6、出现双峰或肩峰。解决方法：进样量过大；样品浓度过；保护柱或色谱柱柱头堵塞；保护拄或色谱柱污染或失效；柱塌陷或形成短通道。
7、前伸峰。解决方法：进样量或样品浓度；溶解样品的溶剂较流动
通过以上对进口色谱柱几种故障分析及排除方法介绍，是否对进口色谱柱的使用又有了的认识与了解。
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